現場で使える 理系実務のやさしい基礎講座

PCR反応液には何が入っている？Template DNA、Primer、dNTP、DNAポリメラーゼ、Buffer、Mg²⁺、水について、それぞれの役割を初心者向けにわかりやすく解説します。Master Mixやオリゴについても紹介します。

PCRで複数のプライマーを混合すると、濃度はどう変わる？20 µMのプライマーを等量混合した場合の計算から、原液の希釈、異なる比率でのprimer mix作製、PCR反応液中の終濃度まで、具体例を使って初心者向けに解説します。

PCR反応液の組成表の見方と、Buffer・dNTP・Primer・DNAポリメラーゼ・Template DNAの添加量を計算する方法を初心者向けに解説。C₁V₁＝C₂V₂、DNA濃度の調整、Master Mixの作り方まで紹介します。

PCR酵素はなぜ−20℃で保存しても凍りにくいのでしょうか？保存液に含まれるグリセロールの役割や、粘性・凝固点との関係、酵素を安定して保存する仕組み、ピペッティングやボルテックスなど実験時の取り扱いのコツを初心者向けに解説します。

酵素の単位「U（Unit）」とは何を表すのでしょうか？酵素活性の意味から、1 Uの考え方、DNAポリメラーゼの基質dNTP、5 U/µLの読み方・計算方法まで、リンゴの皮むきを例に初心者向けにわかりやすく解説します。

PCR用DNAポリメラーゼでよく見る5'→3'・3'→5'エキソヌクレアーゼ活性、proofreading、High Fidelity、Hot Start、U（unit）とは？Taq DNA polymeraseとKOD DNA polymerase、AmpliTaq GoldやKOD FX Neoを例に、紛らわしい専門用語を初心者向けに解説します。

Taq DNAポリメラーゼとDNAポリメラーゼは何が違う？DNAポリメラーゼの基本的な働きから、PCRで耐熱性のTaq DNAポリメラーゼが使われる理由、酵素の種類や選び方、TaqMan法との関係まで初心者向けにわかりやすく解説します。

ddPCRで使われる蛍光プローブ（TaqManプローブ）の役割や、レポーター・クエンチャー、Taq DNAポリメラーゼによって蛍光が出る仕組みを、イラスト付きで初心者にもわかりやすく解説します。

ddPCRでコピー数を計算するときに使われるポアソン分布を、図やイラストを使って初心者向けに解説。なぜ陰性率からDNAコピー数が分かるのか、-ln（陰性率）の意味や計算の流れまでやさしく説明します。

ddPCRで表示される「copies/μL」とは何を意味するのでしょうか？PCR後のDNA量ではなく、PCR前に存在していた標的DNA分子数を推定した値です。陽性ドロップレット数との違いや、ポアソン補正の考え方も初心者向けにわかりやすく解説します。